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技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLESsirna轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)步驟與轉(zhuǎn)染試劑推薦
2024-09-06 sirna轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)步驟（以24孔板為例）1．接種細(xì)胞對(duì)于貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一天，將細(xì)胞按照每孔1-2x10^5個(gè)細(xì)胞的量進(jìn)行鋪板，使其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度為60%-80%為佳。對(duì)于懸浮細(xì)胞：轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前，用PBS清洗細(xì)胞1-2次，用250μLOpti-MEMI減血清培養(yǎng)基(無(wú)血清)重懸細(xì)胞，在24孔板中進(jìn)行細(xì)胞鋪板，細(xì)胞密度為60-80%。2．準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑-siRNA復(fù)合物（或轉(zhuǎn)染試劑-miRNA復(fù)合物）(1)對(duì)于每孔細(xì)胞，取2μLsiRNA(20μM，DEP...從實(shí)驗(yàn)室到臨床：無(wú)血清細(xì)胞存凍液的轉(zhuǎn)化應(yīng)用之路
2024-08-26 在生物醫(yī)學(xué)研究和細(xì)胞治療領(lǐng)域，細(xì)胞的長(zhǎng)期保存與復(fù)蘇是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的細(xì)胞冷凍保存技術(shù)多依賴于含血清的培養(yǎng)基，但血清來(lái)源的不確定性及可能引入的污染，限制了其在某些領(lǐng)域的應(yīng)用。無(wú)血清細(xì)胞存凍液作為一種新興的細(xì)胞保存解決方案，為細(xì)胞冷凍保存技術(shù)開(kāi)辟了新的篇章。本文將深入探討無(wú)血清細(xì)胞存凍液的原理、優(yōu)勢(shì)及其在細(xì)胞保存領(lǐng)域的重要性。無(wú)血清細(xì)胞存凍液是一種專為細(xì)胞冷凍保存設(shè)計(jì)的無(wú)血清、無(wú)蛋白的保存液。它通常含有細(xì)胞保護(hù)劑，如二甲基亞砜(DMSO)、乙二醇等，這些成分能夠減少細(xì)胞在冷...李記生物預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)（蛋白Marker的分類與選擇）
2024-08-23 蛋白Marker即蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)，是幾種已知分子量的蛋白質(zhì)的混合物，像“尺子”一樣用來(lái)指示蛋白質(zhì)條帶的大小。在WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，蛋白Marker主要是用來(lái)指示蛋白條帶所對(duì)應(yīng)的分子量大小，此外，蛋白Marker還可以用來(lái)輔助判斷蛋白轉(zhuǎn)膜是否成功或蛋白在凝膠上的電泳進(jìn)度等作用，所以選擇合適的蛋白Marker也是實(shí)驗(yàn)成功的重要條件之一。李記生物預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量，以上2個(gè)圖片為兩種緩沖體系下的電泳示意圖。適合作為SDS-PAG...蛋白酶K的酶學(xué)特性及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的重要性
2024-08-17 蛋白酶K，屬于一種廣譜蛋白酶，由白色念珠菌（Candidaantarctica）發(fā)酵產(chǎn)生。它能夠在較寬的pH值范圍內(nèi)（pH4-12）保持活性，且在高溫條件下（65℃）仍能穩(wěn)定工作，這種穩(wěn)定性使蛋白酶K能夠在多種實(shí)驗(yàn)條件下發(fā)揮其作用，成為科研人員手中的得力助手。在分子生物學(xué)領(lǐng)域，蛋白酶K的應(yīng)用尤為廣泛。在DNA提取過(guò)程中，蛋白酶K能夠高效地降解細(xì)胞和組織中的蛋白質(zhì)，包括那些與DNA緊密結(jié)合的組蛋白，從而釋放出純凈的DNA，為后續(xù)的PCR擴(kuò)增、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)提供高質(zhì)量的DNA模板。此...bca法測(cè)蛋白濃度原理、實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)
2024-08-15 蛋白質(zhì)濃度測(cè)定是用于計(jì)算純化方法的回收率的重要方法。常用的測(cè)定方法包括雙縮脲法、Lowry法、紫外吸收法、BCA蛋白濃度檢測(cè)法等。其中常用的方法就是BCA法。BCA全稱是BicinchoninicAcidAssay，也叫SmithAssay，這個(gè)方法是由PaulK.Smith發(fā)明的。這個(gè)方法通過(guò)展示不同濃度樣品的顏色變化來(lái)判斷蛋白的濃度。檢測(cè)原理BCA是一種堿性的水溶性復(fù)合物，性質(zhì)穩(wěn)定。在其提供的堿性環(huán)境下，蛋白質(zhì)可以將BCA試劑中的Cu2+還原為Cu+，Cu+繼而與BCA試...關(guān)于我們
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